Анализы на ВИЧ: какие анализы сдают и как проводят диагностику ВИЧ и СПИД?

Перспективы метода в диагностике ВИЧ-инфекции

ПЦР относится к молекулярно-биологическим методам исследования.

Помимо диагностики ВИЧ-инфекции и ИППП, метод зарекомендовал себя в генетических разработках, в ветеринарной науке, сельском хозяйстве.

Продукты питания исследуют на содержание ГМО с помощью ПЦР.

Также сфера применения метода судебно-медицинская экспертиза.

Но все же нас интересуют, в первую очередь, перспективы ПЦР для постановки диагноза наличия ВИЧ-инфекции.

С помощью ПЦР выявляются даже единицы ВИЧ присутствия в крови.

Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью – от одного до ста единиц ВИЧ.

Выраженная уникальность происходит за счет того, что идет поиск специфичной ДНК (или РНК) присущий конкретному возбудителю заболевания.

Реакция протекания операции копирования фрагментов РНК характеризуется высокой специфичностью метода ПЦР.

Поэтому амплификационная тест-система (ПЦР) выигрывает перед другими тест-системами иммунологического характера (например, ИФА).

Потому что нет «войны» между антигенами.

Еще важна и скорость ПЦР анализа.

Один рабочий день уходит на проведение ПЦР.

Но есть у метода и негативные качества.

Если ВИЧ-инфекция попадет в исследуемую кровь случайно, из воздуха, при ее отсутствии в организме, реакция копирования вируса все равно будет идти.

Поэтому и нужна такая стерильность в лаборатории, в которой проводиться ПЦР.

Благодаря большому непостоянству генетического материала ВИЧ уменьшаются диагностические показатели чувствительности.

Хотя сам метод очень чувствительный.

Чувствительность метода ПЦР характеризуют 98%. У ИФА этот показатель выше – 99%.

А за данными статистики или вовремя не продиагностируемые заболевшие или, наоборот, неправильно продиагностируемые о наличии в организме ВИЧ-инфекции.

Для лабораторий, в которых ПЦР проводиться, разрабатываются специальные системы внутреннего контроля, с целью повышения качества диагностики.

На основе стандартизированных межлабораторных панелей качества минимализируют ошибки тестирования.

Если все сделано правильно, без ошибок, то с помощью ПЦР можно определить только один фрагмент провируса на десять тысяч – сто тысяч лимфоцитов.

Методом определяют и резистентность к препаратам антиретрорвирусной терапии.    

Конечно, метод несовершенный, но у него большие перспективы.

Особенно на ранних стадиях инфицирования, когда в крови еще нет антигенов.

Метод хоть и недешевый, но правильно проведенный, с соблюдением всех условий правильной постановки, очень информативный.

За ним — большое будущее.

В умелых руках ПЦР мощный диагностический инструмент.

Анализы на ВИЧ: какие анализы сдают и как проводят диагностику ВИЧ и СПИД?

Главное – уметь им пользоваться и избегать всевозможных ошибок.

ВИЧ-инфекция определяется на разных этапах следующими методами:

  • ИФА — иммуноферментный анализ.
  • Вестерн-блот.
  • ПЦР — полимеразная цепная реакция.
  • Экспресс-тесты.

Метод ПЦР был разработан американским биохимиком Кэри Муллисом, который получил за это в 1983 году Нобелевскую премию. Сегодня этот метод в медицине при диагностике всех инфекций считается ведущим в силу своей точности и информативности. ВИЧ в этом плане не исключение.

ИФА анализ на ВИЧ – это первый этап диагностики. Антигенами вируса иммунодефицита являются протеины p24, p15, p17, p31 и гликопротеины gp 41, gp55, gp66, gp120, gp160.

Чтобы обнаружить вирусный белок, берут порцию крови из вены. Образец, направленный на исследование крови ИФА, обрабатывают иммуноферментными реагентами. Из крови выделяют сыворотку. Если в ходе исследования обнаруживаются антитела к ВИЧ, значит, в крови уже присутствует вирус.

забор крови на ПЦР ВИЧ

Кровь сдают строго натощак. За 2 дня до анализа не рекомендуется есть жирную пищу и употреблять алкоголь. Следует за 14 дней прекратить прием противовирусных препаратов.

Преимущества метода:

  • сравнительно небольшая стоимость;
  • высокая стабильность реагентов;
  • высокая чувствительность;
  • короткий срок проведения;
  • минимальное влияние человеческого фактора.

Современные тест-системы для ИФА производят по мировым стандартам. Это повышает точность метода.

Иммуноферментный анализ не всегда дает достоверные результаты. После попадания вируса в кровь начинается латентная (скрытая) стадия развития. Период, пока вирусы не начали размножаться, и антитела еще не сформированы, называется «время серонегативного окна».

Делать ИФА на этом этапе бессмысленно. Если заражение произошло, результат будет ложноотрицательным. Как быстро вирус себя обнаружит, зависит от того, какое количество опасных клеток попало в организм. При незащищенном половом акте или переливании зараженной крови этот срок будет минимальным.

иммуноферментный анализ

Для высокой достоверности ИФА на ВИЧ исследование проводят трижды. Сроки сдачи ИФА на вирус иммунодефицита человека:

  • через 6 недель после вероятного контакта,
  • через 3 месяца,
  • спустя полгода.

ИФА 4 поколения на ВИЧ – метод, наиболее информативный на ранних сроках заражения. Его можно проводить уже через 1 месяц после предполагаемого инфицирования. Тест на ВИЧ 4 поколения является дорогостоящим по сравнению с аналогом 3-го поколения.

Поэтому в государственных медучреждениях он используется как дополнительный метод диагностики. Бесплатно проводится тест 3. Если по его итогам однозначного ответа дать нельзя, пациента направляют на ИФА 4 поколения.

Если при ИФА выявлены антитела к антигенам ВИЧ, необходимо проводить дополнительные исследования. К таким относится полимеразная цепная реакция (ПЦР). Достоверность этого метода – 80%. С помощью ПЦР исследуют кровь, сперму и влагалищные выделения.

Биологическую жидкость расщепляют в медицинском реакторе, затем подвергают обработке ферментами. В итоге получают данные о том, какова концентрация клеток ВИЧ в жидкой среде. Из-за большой погрешности (20%) при положительном результате дополнительно проводят иммунный блоттинг.

Следующий этап диагностики – тест Комбо (или иммунный блоттинг). Это высокочувствительное исследование (98% достоверности), которое проводят, если через 6 месяцев результаты ИФА неоднозначны.

ПОДРОБНОСТИ:   Исследование сосудов головного мозга обзор лучших методов

В чем суть метода

Анализы на ВИЧ: какие анализы сдают и как проводят диагностику ВИЧ и СПИД?

Любая живая клетка содержит РНК и ДНК. Эти нуклеиновые кислоты способны к самокопированию и самовоспроизведению. Для каждой инфекции фрагменты ДНК уникальны. В биологических жидкостях эти обломки нуклеиновых кислот циркулируют.

Они улавливаются и распознаются специальной аппаратурой — реактором. Это и есть основа метода. Лаборант ведет подсчет этих фрагментов. У ретровируса ВИЧ отслеживают РНК. Даже при единичных копиях вирусных частиц ПЦР может их обнаружить и посчитать.

В качестве исследуемой жидкости чаще всего используется венозная кровь. Специальные компоненты метода вступают в связь с частицами вируса и делают их определяемыми, потому что происходит многократное увеличение найденных фрагментов.

В случае с ВИЧ результат наличия вируса можно получить задолго до того, как появится клиника. Поэтому в силу своей высокой чувствительности ПЦР имеет такое высокое диагностическое значение. Огромный плюс ПЦР заключается в универсальности метода. Инкубационный период инфекции для ПЦР не преграда.

ПЦР – диагностический подход, появившийся в клинической медицине благодаря молекулярной биологии. Именно из этой ветки науки исследование пришло в медицину. И стало активно использоваться для постановки различных диагнозов, включая заражение ВИЧ-инфекцией.

Всем известно, что любой живой организм состоит из ДНК и РНК. Полимеразная цепная реакция основана на способности этих нуклеиновых кислот к самовоспроизведению.

ДНК диагностика

Важно помнить, что ПЦР способна определять даже небольшие концентрации вирусных частиц в крови. Происходит это благодаря тому, что в биологической жидкости циркулируют «обломки» нуклеиновых кислот, которые улавливаются и распознаются специальной аппаратурой.

И вирусные частицы еще не успели размножиться в организме пациента. Полученный от пациента биологический материал помещается в специальный реактор. Чаще всего используется венозная кровь.

Специальные компоненты, взаимодействуя с частицами вируса, многократно увеличивают число обнаруженных фрагментов. В итоге фрагменты становятся определяемыми, их можно оценить и сделать выводы о заражении.

Сдают кровь из вены по стандартной методике.

Перед посещением врача не принимают пищу, приходить лучше с утра. Если пациент проходит курс иммуностимуляции, необходимо прервать его за две недели до анализа.

Плюсы ПЦР при ВИЧ

Как и любой другой метод диагностики той или иной болезни, ПЦР-исследование имеет ряд преимуществ и недостатков. К преимуществам метода относят:

  • низкую вероятность столкнуться с ложноотрицательным или ложноположительным итогом;
  • возможность использовать для исследования не только кровь, но и другие биологические жидкости, такие как выделения из влагалища, сперма и др. (правда, как отмечают врачи, точность может снижаться);
  • возможность использовать единожды взятый материал для диагностики сразу нескольких заболеваний;
  • быстроту получения результатов (если анализ срочный, то итоги получают уже на следующий день);
  • возможность быстро диагностировать заражение и, соответственно, начать терапию заболевания, улучшив таким образом прогноз;
  • отсутствие ограничений по возрасту (забор крови из вены можно выполнить даже новорожденному малышу).

Естественно, недостатки у ПЦР тоже есть. К ним относят:

  • немаленькую цену на исследование, особенно в сравнении с базовыми скрининговыми методами, применяемыми в большинстве больниц;
  • необходимость наличия сложного оборудования, которое также стоит недешево;
  • вероятность все же столкнуться с ложными результатами, если нарушена технология выполнения анализа, процесс забора крови или человек страдает от аутоиммунного, опухолевого или хронического инфекционного заболевания.

Естественно, выполнять ПЦР исследование стоит по рекомендации врача.

Доктор сможет оценить в каждом конкретном случае, насколько достоверными будут результаты. Если врач посчитает это необходимым, он вместо ПЦР посоветует своему пациенту другой метод диагностики. Или после получения результатов дополнит план диагностических мероприятия дополнительным пунктом.

Достоинствами метода являются крайне малая вероятность ложноположительного результата, универсальность реакции для любых биологических жидкостей организма. Анализ имеет широкий спектр:

  • Один забор крови можно использовать для выявления разных инфекций.
  • Методика относится к срочным, результат бывает готов уже на следующий день.
  • Достоверность составляет от 85 до 98%.
  • Наличие ВИЧ можно определить через 10-14 дней после заражения (антител при этом сроке еще нет).
  • Нет возрастных ограничений, проводить можно сразу с момента рождения.

Недостатки ПЦР заключаются в следующем:

  • Дороговизна анализа.
  • Необходимо сложное медицинское оборудование.
  • Требуется высокая квалификация лаборанта и врача, берущего анализ.
  • Реакция высокочувствительна, поэтому погрешность может составить 20%.
  • Может получиться ложноположительный результат, если у пациента есть аутоиммунные процессы, онкология, хронические инфекции.
  • Необходима особая чистота помещения лаборатории, потому что вирус может попасть в анализ из воздуха. Тогда результат будет неправильным.

Для лабораторий, в которых проводится ПЦР, для улучшения качества диагностики разработаны специальные жесткие меры по системе СанПиНа на внутренний контроль. Кроме того, должны быть соблюдены все правила работы при такой методике:

  • Требуется строго следить на информацией на пробирках.
  • Перед забором крови вновь посмотреть и удостовериться в назначении анализа.
  • Медсестра должна сделать правильную маркировку пробирок.
  • Врач-лаборант должен правильно провести все манипуляции с биоматериалом, чтобы не допустить перекрестное загрязнение.
  • Тест-система должна быть отличного качества.

Только при соблюдении всех этих условий погрешность в ответе может составить всего около 2% эпизодов.

Стоимость исследования

Через сколько сдавать ВИЧ ПЦР

Метод ПЦР – достаточно дорогой. В этом заключается один из его больших минусов. Для его проведения нужна новейшая аппаратура и высокая квалификация врача-лаборанта. В силу сказанного ПЦР-диагностика не выполняется в небольших населенных пунктах. Сдать анализ можно только в специализированных крупных клиниках.

ПОДРОБНОСТИ:   Макроглобулинемия Вальденстрема: симптомы и лечение болезни

Стоимость определения ДНК ВИЧ в клиниках Москвы от 2 800 рублей, выяснение с помощью ПЦР вирусной нагрузки (РНК вируса в плазме) – от 8 800 рублей, а резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы – от 16 500 рублей.

Как видим, цены достаточно высокие. ПЦР можно провести бесплатно в государственных поликлиниках по полису ОМС. Важно, что процедуру можно сделать анонимно. В регистратуре пациент получает номер, по которому он сможет узнать результат. В современных медцентрах имеются личные кабинеты клиентов, куда эти данные будут внесены.

ПЦР-диагностику на ВИЧ назначают в таких случаях:

  • Выявление инфекции у ребенка, рожденного от больной матери или носительницы, чтобы определить внутриутробное инфицирование.
  • Если ИФА дал сомнительные результаты (ПЦР на ВИЧ помогает в этом случае поставить окончательный диагноз).
  • Для выявления количественного содержания вируса в организме.
  • При положительном иммуноблотинге – они с ПЦР дополняют друг друга.
  • Тестирование доноров.
  • Для ранней диагностики ВИЧ.
  • Для определения эффективности и резистентности к АРВТ.

Преимущество указанного анализа и в том, что ПЦР на ВИЧ можно проводить даже детям до года.

Исследование чаще выполняют не для первичной диагностики, а уже в процессе лечения. Первичная диагностика – это серологические исследования (при них определяют уровень антител к ВИЧ). При ложноположительном результате его повторяют – это может быть при низкой вирусной нагрузке.

ПЦР диагностирует ВИЧ, когда еще нет к нему антител. Метод ИФА в этом случае не даст ответа.

А ПЦР на ВИЧ будет уже положительным. Но симптомы данного периода ВИЧ неспецифичны. Пациент сначала долго и безуспешно лечится по поводу ОРВИ у терапевта. Следует иметь в виду, что диагноз ВИЧ только на основании ПЦР не ставится, необходимо прохождение и других комплексных тестов. Метод ПЦР служит чаще вспомогательным для сложных случаев.

Несмотря на массу преимуществ, ПЦР не считается идеальным методом диагностирования. К нему обращаются в случае необходимости получения скрининговых тестов на наличие ВИЧ в организме.

Многих пациентов волнует вопрос о том, насколько достоверна полимеразная цепная реакция в том случае, если планируется диагностировать вирус иммунодефицита человека. Несмотря на то, что ПЦР – это одна из самых современных методик, на все 100% все же нельзя доверять даже ей.

Сегодня ПЦР до сих пор не используется как скрининговый метод именно из-за того, что может давать ложноположительные результаты.

Чтобы избежать этого, врачи рекомендуют правильно готовиться к забору биоматериала, но даже подготовка не всегда помогает. Например, тест может дать положительный результат, если у человека есть злокачественная опухоль в организме.

Если он страдает от любой хронической инфекции или, например, аутоиммунного процесса. Даже несмотря на наличие вероятности получить ложноположительный результат, ПЦР используется в практике, как один из самых надежных методов.

Чтобы исключить ошибки, врачи часто рекомендуют своим пациентам сдавать анализ повторно, если результат оказался положительным. Также в ряде случаев рекомендуется дополнительно проводить ИФА реакцию и другие исследования.

Когда рекомендуется выполнение

Многих пациентов волнует вопрос о том, всем ли людям делается ПЦР-исследование на ВИЧ. На самом деле диагностика обязательна не для всех. Однако есть группы пациентов, которым изредка приходится сдавать кровь для анализа.

  • Предварительная диагностика

Исследование может быть рекомендовано пациентам, которые обратились к дерматовенерологу после незащищенного полового контакта с ненадежным партнером. Итоги можно получить быстро и затем подтвердить их с помощью ИФА.

  • Положительное иммуноглобулиновое исследование

Иммуноблотинг, который дал положительный результат на вирус иммунодефицита человека, обязательно подтверждают с помощью полимеразной цепной реакции. Аналогично поступают, если ПЦР выполнялась первой. Дополнение исследований друг другом почти полностью исключает вероятность ошибок.

Пациенты с подтвержденным ВИЧ-статусом довольно регулярно сдают кровь на ПЦР. Это необходимо, чтобы контролировать ход лечения и, если необходимо, корректировать терапию.

  • Оценка безопасности крови

Любая донорская кровь должна быть исследована с помощью полимеразной цепной реакции.

Это исключает передачу ВИЧ-инфекции через переливание крови.

  • Оценка статуса новорожденного

Если ребенок рожден от ВИЧ-положительной женщины, ему также обязательно выполняется ПЦР. Это необходимо, чтобы определить статус ребенка и выработать тактику его дальнейшего ведения.

Подготовка к анализу

Перед тем как сдать ПЦР на ВИЧ, за 2 дня до анализа нужно не употреблять жирную пищу, алкоголь. Также лучше психически и физически не напрягаться. Если пациенту назначен курс иммуностимуляции, его прекращают за 2 недели до анализа.

Кровь лучше сдавать в утренние часы. Исследовать можно и другие биологические жидкости организма (сперму, секрет вагины), но лучшим материалом является кровь. Слюну, пот, мочу и слезы не используют, так как содержание вируса в них минимально.

Для чего можно использовать тест

Далеко не все пациенты знают, для чего конкретно применяется полимеразная цепная реакция в клинической практике врача.

Ее рекомендуется проводить, если:

  • Необходимо обнаружить заболевание в латентном периоде

Вирус иммунодефицита в течение длительного времени может существовать в организме латентно.

ПЦР – единственное исследование, способное указать на присутствие патогена в организме. Даже в том случае, если вирусных частиц еще совсем мало.

ПОДРОБНОСТИ:   Стоимость МРТ позвоночника и особенности метода диагностики

Сегодня выявлено несколько генотипов ВИЧ-инфекции. Часто важно определить, какой конкретно генотип заразил человека, так как от этого зависит подбор противовирусных препаратов.

  • Определение именно вируса, а не антител к нему

Одно из преимуществ анализа состоит в том, что с помощью методики можно выявить не антитела к вирусным частицам, а непосредственно сам вирус.

ВИЧ методом ПЦР

Почему это именно преимущество, интересуются многие пациенты. Дело в том, что если упор делается на обнаружение самого патогена, уменьшается вероятность столкнуться с ложноположительными реакциями из-за схожести различных антител.

В какие сроки сдавать

Часто пациенты интересуются вопросом о том, через сколько можно посетить врача, чтобы сдать биологический материал.

Все зависит от того, что именно планируется определять с помощью методики.

ДНК вируса иммунодефицита человека рекомендуется искать в том случае, если есть подозрение на заражение инфекцией, и необходима ранняя диагностика. В крови ДНК в среднем начинает определяться через десять дней после того, как заражение произошло.

Если ИФА подтверждает диагноз, статус пациента расценивается, как положительный.

Исследование для определения РНК всегда носит количественный характер. Его рекомендуется проводить в том случае, если положительный статус пациента подтвержден, и начато лечение с помощью противовирусной терапии.

Некоторые штаммы ВИЧ проявляют резистентность к препаратам, используемым для их лечения. Чтобы оценить вероятность отсутствия реакции на лечение, также рекомендуется проводить исследование. Ее выполняют, если после назначения терапии улучшение не наступает. Также она рекомендована в острый период инфекционного процесса.

Вирус иммунодефицита человека с каждым годом распространяется в человеческой популяции все активнее. Столкнуться с патологией может любой человек, а потому иногда жизненно необходимо знать, как правильно поставить диагноз.

ПЦР – хороший метод диагностики, если он правильно используется врачом. А пациенту главное – соблюдать рекомендации доктора по подготовке к исследованию, в которых нет ничего сложного.

Когда берут кровь на анализ?

Через сколько сдавать ПЦР на ВИЧ? Достоверный результат можно получить уже при взятии крови через 4-4 дней после предполагаемого инфицирования. Через 2 недели достоверность на ВИЧ составит 98%, а при сроке 5 дней – 80%.

Анализ ИФА будет результативным только при наличии антител к вирусу, это время может занимать от 1-3 месяцев до полугода. Так как ИФА дает вероятность выше (98%-99,9%), ПЦР нельзя назвать 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции. Но зато это единственная методика, при которой не нужно ждать появления антител.

При ВИЧ методом ПЦР можно получить сведения об эффективности АРВТ, о стадии заболевания ВИЧ и количестве ВН (количественная оценка нахождения ВИЧ в организме). Это будет говорить о тяжести и степени изменений.

Сдать анализы на ПЦР при ВИЧ нужно и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не указывает на достоверность ВИЧ-инфицирования клинически.

Сдают анализ не только при заражении и случайной половой связи. Другие поводы:

  • Планирование беременности.
  • Предстоящая операция.
  • Случайная половая связь.
  • Некоторые профессии требуют сдачи этого анализа для допуска на работу (педагоги, врачи и другой медицинский персонал).
  • Заключенные.
  • Больные ТБ.
  • Работники МЧС и полиции.
  • Вернувшиеся после отпуска из экзотических стран (при желании удостовериться, что нет инфицирования).
  • Проститутки.
  • Иностранные студенты.
  • Наркоманы.

Также к сдаче анализа на ВИЧ может вынудить определенная симптоматика у пациента:

  • Резкая потеря веса.
  • Диарея, длящаяся больше 3 недель.
  • Беспричинное повышение температуры в течение длительного времени.
  • Увеличение лимфоузлов.
  • Невыясненная причина пневмонии, кандидоза и пр.

Расшифровка анализа – прерогатива лечащего врача, а не лаборанта.

ПЦР или ИФА, что лучше?

При ПЦР-диагностике ВИЧ РНК вируса выявляется и качественно, и количественно. Этот анализ четко идентифицирует конкретный патоген даже при условии наличия нескольких перекрестно реагируемых. Биологический материал можно использовать даже в засохшем виде.

Задача и возможность ИФА – определение наличия антител к ретровирусу. Хотя его точность 99%, на ранних стадиях он неприменим.

Количественный анализ на ВИЧ

Проводится уже только ВИЧ-инфицированным с целью подсчета количества копий РНК вируса в биопрепарате.

Цель такого исследования — мониторинг проводимого лечения и выявление резистентности вируса к нему. Противовирусная терапия в таких вычислениях не назначается врачом вслепую, поэтому будет являться более эффективной. Количественный ПЦР на ВИЧ-инфекцию делают гораздо чаще. Отображается этот анализ копией/мл крови.

Какие результаты могут быть выданы:

  • РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл). Нет достоверности диагноза.
  • От 20 – до 10 в 6 степени копий/мл – диагноз достоверный.
  • Более чем 10 в 6 степени копий/мл — большая ВН.

Лаборатории могут выполнять анализ ПЦР на ВИЧ в режиме Real-time. Это подразумевает наблюдение и численную оценку накапливания продуктов ПЦР при автоматической фиксации результатов.

Adblock
detector