Метод ПЦР при диагностике хламидиоза, подготовка и расшифровка исследования

Что такое пцр?

ПЦР – идеальный метод диагностики хламидиозаПЦР, или полимеразная цепная реакция, — один из наиболее важных анализов, позволяющих быстро определить хламидиоз. Его точность составляет 98%. Суть данного метода заключается в том, что во время анализа специалист ищет в биологическом материале частицы хламидий – их ДНК. Его можно чаще всего диагностировать в соскобе. Трахоматис – ДНК бактерии – имеет небольшой размер, однако в то же время содержит всю генетическую информацию об бактерии. Учитывайте, что если в организме присутствует даже небольшое количество хламидий, то анализ обязательно покажет это в результатах.

Из-за своей высокой точности многие врачи называют ПЦР – идеальным методов диагностики хламидиоза. Для исследования обычно берут соскоб со слизистой полового органа или же небольшое количество выделений. При наличии инфекции эти материалы всегда заражаются первыми.

Несмотря на большое количество преимуществ, полимерная цепная реакция имеет ряд недостаток. В первую очередь нужно учитывать, что анализ не может сказать, какие клетки обнаруживаются в биологическом материале: живые или мертвые. Именно по этой причине ПЦР не может использоваться в качестве исследования, контролирующее эффективность лечения.

Положительный результат по ПЦР не всегда говорит о том, что в организме присутствует хламидиоз. Именно по этой причине врачи назначают пациенту сразу комплекс диагностических исследований. В то же время нужно помнить, что отрицательный показатель также не говорит о том, что бактериального заражения нет.

Клинический материал для пцр

Виды биоматериала для анализа

Клинический материал для ПЦР

Чтобы провести анализ ПЦР, врачу необходимо взять небольшое количество биологического материала. В его качестве может выступать кровь, образцы тканей, а также некоторые биологические жидкости. Специалист сам выберет, какой материал лучше всего использовать конкретно в вашем случае. Чаще всего берут для мужчин мазок из уретры, сок предстательной железы, эякулят, синовиальная жидкость.

Помните, что ПЦР на хламидиоз может проводится также детям. Такое обследование допустимо даже для малышей небольшого возраста и новорожденных. Они могут легко подхватить эту инфекцию во время прохождения по родовым путям. Помните, что во время менструации сдавать ПЦР запрещено. Это качественное исследование, которое показывает, присутствуют ли бактерии в мазке или нет. В норме их быть не должно.

Недостатки

Несмотря на массу положительных сторон, метод ПЦР обладает рядом недостатков:

  1. ПЦР способна определить даже мёртвые патогенные микроорганизмы, поэтому перенесённая ранее инфекция может исказить результаты исследования.
  2. Сверхчувствительность метода – это и достоинство, и недостаток, который может обернуться неправильным диагнозом в результате внешнего воздействия. Несоблюдение правил во время проведения исследования (например, неработающий воздушный фильтр) исказит результаты.
  3. Врач должен правильно взять биоматериал пациента, чтобы в пробу не попали посторонние микроорганизмы.
ПОДРОБНОСТИ:   Альтернатива гипсу при переломе руки, ноги

На самом деле неверный результат исследования зависит только от квалификации и внимательности врачей, а также от соблюдения правил сбора биоматериала. Кроме этого, врач должен интерпретировать результаты, а при возникновении сомнений назначать иммуноферментный анализ. Он способен уточнить стадию, до которой развился хламидиоз.

Особенности

Основная особенность ПЦР как исследования на хламидии заключается в том, что для проведения данного обследования допустимо использовать абсолютно любой биологический материал. Для этого с успехом берут кровь, половые жидкости, секреты, мазки и соскобы.

Именно этот метод является максимально универсальным, а также удобным. Вы не будете испытывать никакого дискомфорта во время взятия материала, вы быстро получите достоверный результат. Обычно диагностировать хламидиоз при помощи ПЦР удается тогда, когда на поверхности слизистой оболочки появляются небольшие очаги воспаления. Правильность полученного результата зависит от того, как правильно вы подготовитесь к обследованию. Вы должны придерживаться следующих правил:Отказ от половых связей за неделю до забора биологического материала

  • Отказаться от приема антибиотиков как минимум за месяц до сдачи анализа;
  • Отказаться от половых связей за неделю до забора биологического материала;
  • Проводить обследование необходимо во время обострения заболевания;
  • За 3 дня до исследования запрещено проводить спринцевание;
  • Отправлять на забор материала можно только по прошествии 3 часов с последнего мочеиспускания;
  • ПЦР не проводится во время менструации и 2 дня после нее.

Основная опасность хламидиоза таится в длительном бессимптомном протекании. Существуют случаи, когда бактерии обнаруживались спустя несколько лет после заражения. Именно по этой причине ПЦР – обязательное обследование, на которое отправляется человек для определения любых инфекций, передающихся половым путем. Также анализ проводится беременным женщинам, ведь хламидии способны нанести серьезный вред ребенку.

Подготовка организма к анализу

Забор биоматериала не вызывает неприятных ощущений, да и особой подготовки не требуется. Тем не менее следует соблюдать некоторые правила, чтобы анализ дал максимально точный результат при диагностировании болезни.

ПОДРОБНОСТИ:   Растяжение мышц руки – симптомы, лечение и восстановление

Если назначен мазок вагинальный на выявление хламидии, то:

  • нельзя проводить процедуру при менструации;
  • не рекомендуется вступать в половые связи за 20 дней до сдачи анализа;
  • с последнего приёма антибиотиков или других сильных медикаментов (стоит уточнить у врача) должен пройти хотя бы месяц;
  • в день забора биоматериала нельзя мыть половые органы антибактериальными средствами;
  • использование вагинальных свечей, кремов и других препаратов местного значения отрицательно сказываются на достоверности анализа.

Для сдачи крови на ПЦР нужно помнить, что:

  • перед забором биоматериала нельзя есть, пить и даже жевать леденцы;
  • за 24 часа следует не употреблять жареную и жирную пищу, рекомендуется провести «разгрузочный день» или соблюдать лёгкую диету;
  • медикаменты могут исказить результаты, поэтому советуют не употреблять их (если от них не зависит жизнедеятельность организма).

Моча тоже используется для ПЦР и она требует соблюдения следующих правил:

  • моча должна быть утренней;
  • емкость для сбора урины должна быть стерильной (лучше приобретать в аптеке);
  • необходимо вымыть наружные половые органы перед сбором биоматериала;
  • женщинам следует предотвратить возможное попадание микроорганизмов из влагалища – для этого достаточно закрыть вход в половой орган с помощью стерильной ваты.

Несоблюдение правил чревато ложным отрицательным или положительным результатом и, как следствие, неверным лечением или повторными анализами.

Показания для пцр

Основа работы полимеразной цепной реакции – это многократное дублирование фрагментов цепочки ДНК, соответствующих заданным требованиям. ДНК берётся из биоматериала пациентов: слюны, мочи или крови. В ходе работы на выделенный биоматериал воздействуют с помощью реагентов.

Распространённое назначение ПЦР – выявление хламидиоза при проявлении симптомов или при подозрении на болезнь.Также врач может назначить ПЦР, чтобы подтверждать или опровергать наличие гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции, герпеса, кандидоза и других вирусных и грибковых инфекций мочеполовой системы.

Важно отметить, что выявление хламидиоза – не единственное назначение процедуры. Также её используют для:

  • определения предрасположенности к некоторым патологиям;
  • определения степени родства (чаще всего проводится тест на отцовство);
  • клонирования определённых генов с необходимыми характеристиками;
  • выделения ранее отсутствовавших генов (например, мутировавших);
  • выявления причин бесплодия и выкидыша.
ПОДРОБНОСТИ:   Компрессионный перелом позвоночника – что это такое и как лечить с помощью медикаментов или хирургически

Сдавать любой анализ, использующий ПЦР в качестве основы, можно всем людям в любом возрасте вне зависимости от болезни (в том числе и беременным женщинам).

Пцр на хламидии при беременности

ПЦР на хламидии при беременности

Чем раньше вам диагностируют хламидиоз и назначат эффективное лечение, тем выше шанс сохранить нормальное развитие у плода.

Анализ на ПЦР является составляющей частью обследования любой беременной женщины. Его проводят даже в том случае, если у женщины не менялся половой партнер на протяжении долгого времени. Помните, что хламидии способны долгое время жить в организме и не проявлять себя никакими симптомами.

Расшифровка результатов

Анализ ПЦР – это качественный, а не количественный метод. Это означает, что результатом обследования является не число бактерий в собранном биоматериале, а наличие или отсутствие патогенных микроорганизмов.

Протокол анализа ПЦР должен содержать ФИО пациента, дату проведения исследования, целевую бактерию и результат. Зачастую вместо словесной расшифровки результата ставится « » или «-».

Ход реакции

Как происходит реакция

Ход реакции

Проведение ПЦР включает в себя отдельных 20-20 циклов, каждый из которых включает в себя три отдельные стадии. В самом начале двухцепочечную ДНК-матрицу подогревают до 96 градусов на протяжении нескольких минут, чтобы цепи окончательно разошлись. Такое явление называют денатурацией – разрушением водородной связи. Смесь, в которую окунают ДНК, заранее разогревают, чтобы денатурация прошла максимально полно.

Когда цепи расходятся, температуру воздействия снижают. Это позволяет специальному праймеру связаться с одноцепочечной матрицей. Эту стадию принято называть отжигом. Рабочая температура на этом этапе зависит от вида праймера, обычно назначается на 4-5 градусов ниже, чем температура плавления. На этой стадии клетки ДНК проводят 1-2 минуты.

Во время ПЦР происходит реплицирование матричной цепи за счет воздействия праймером. Эту стадию принято называть элонгацией. Рабочая температура на этом этапе полностью зависит от полимеразы. В большинстве случаев эти препараты показывают высокую активность уже при 72 градусов.

Длительность процедуры зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и длинны амплифицируемого фрагмента. В большинстве случаев на одну минуту ставят несколько тысяч пар оснований. Когда все циклы будут завершены, врач проводит дополнительную или финальную элонгацию. Она позволяет достроить все одноцепочечные фрагменты. Длительность этой стадии может составлять около 10 минут.

Adblock
detector